Stage de Master 2. Caractérisation des exsudats racinaires contrôlant la complexation des métaux en cas de carence en fer

Vous serez accueilli(e) au sein du Laboratoire Réactions et Génie des Procédés (LRGP, UMR 7274 Université de Lorraine – CNRS) et du Laboratoire Sols et Environnement (LSE, UMR 1120 Université de Lorraine - INRAE) et travaillerez dans le cadre d’une collaboration avec la plateforme de Structure d'Analyse et de Mesure en Procédés (SAMPL) du LRGP et la Plateforme d’Analyse Structurale et Métabolomique (PASM) de l’ENSAIA.  Contexte : L’acquisition des métaux par les plantes est un processus fondamental qui régit la nutrition végétale, le fonctionnement des écosystèmes et le devenir des métaux traces dans les sols. Pendant longtemps, on a considéré que les racines des plantes absorbaient principalement des ions métalliques libres, tandis que la complexation par des ligands organiques était généralement supposée réduire la biodisponibilité des métaux. Cependant des travaux montrent que les complexes métal-ligand jouent un rôle clé dans la dynamique des métaux dans la rhizosphère et pourraient même être directement absorbés par les racines des plantes. Bien que les mécanismes d’acquisition du fer soient bien compris chez les graminées grâce à la sécrétion d’acides muginéiques, les molécules impliquées dans l’absorption du fer chez la plupart des espèces végétales restent largement méconnues. L’identification de ces métabolites chélatants des métaux reste un défi scientifique majeur en raison de la complexité des mélanges d’exsudats racinaires.  Objectifs du stage : L’étudiant(e) participera au développement d’une approche pluridisciplinaire d’analyse des exsudats racinaire combinant la chromatographie d’affinité et la métabolomique pour découvrir des composés naturels chélateurs de métaux libérés par les racines des plantes. Le stage comportera deux tâches complémentaires : Tâche 1 – Production et caractérisation des exsudats racinaires (LSE) Culture d’Arabidopsis thaliana et de Noccaea caerulescens dans des conditions suffisantes et carencées en fer ; Collecte et préparation des exsudats racinaires ; Participation aux analyses métabolomiques non ciblées utilisant la HPLC-MS/MS haute résolution ; Analyse comparative des profils métabolomiques avant et après enrichissement par affinité. Tâche 2 – Séparation des molécules complexantes de métaux par IMAC (LRGP) Développement et optimisation des méthodologies IMAC (Chromatographie d’Affinité par Immobilisation de Métaux) ; Mise en œuvre des séparations Ni²⁺-IMAC et Fe³⁺-IMAC ; Évaluation de la sélectivité métallique et des mécanismes de rétention ; Isolement de fractions enrichies en métabolites liant les métaux ; Participation à l’interprétation des interactions métal-ligand.