Stage M2 - Décrypter la transmission des résistances aux antibiotiques entre les compartiments humain, animal et environnemental

Vous serez accueilli(e) au sein de l’UMR1436 INRAE/ENVT INTHERES située sur le site de l’Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse. Cette unité de recherche, composée d’une quarantaine d’agents, est dédiée à la recherche sur les innovations thérapeutiques pour la réduction et l’optimisation des usages des antibiotiques et des antiparasitaires. Vous intégrerez l’axe « Antibiotiques : pathogènes, microbiote et environnement. » Ce projet de stage de M2 s’inscrit dans le cadre de l’étude CARBA-TER dont l’objectif est de caractériser des entérobactéries productrices de carbapénèmases (EPC) sur le territoire d’une métropole française. Dans ce cadre, des isolats d’EPC ont été isolées à partir de trois compartiments représentant les interfaces « One Health » : (i) la sphère humaine, à travers des souches cliniques issues des centres hospitaliers universitaires (CHU) ; (ii) la sphère animale, à partir de prélèvements de portage digestif réalisés chez des chiens, des chats et des chevaux, hospitalisés ou non ; et (iii) la sphère environnementale, via des souches isolées d’eaux usées domestiques et hospitalières. Vous serez plus particulièrement en charge de : L’objectif du stage de M2 sera d’extraire l’ADN de ces isolats en vue de leur séquençage génomique en technologie short-read, puis d’analyser les données obtenues afin d’identifier d’éventuels événements de dissémination clonale et/ou plasmidique entre les trois compartiments. Les analyses bio-informatiques comprendront : (i) l’assemblage et le contrôle qualité des génomes (ii) l’identification des gènes de résistance et des déterminants de virulence, et (iii) le typage clonale (MLST, phylogroupes, cgMLST), et (iv) la détection et la classification des réplicons plasmidiques. À l’issue de ces analyses, une sélection de souches sera soumise à un séquençage en technologie long-read afin de reconstruire les plasmides, de caractériser leur contenu en gènes de résistance et d’évaluer leur potentiel de transfert. Enfin, des expérimentations de transfert in vitro seront menées sur des isolats contenant des plasmides conjugatifs. Ces expérimentations permettront d’évaluer le potentiel de dissémination des plasmides porteurs de gènes de résistance entre bactéries, et de mieux comprendre leur rôle dans la propagation de l’antibiorésistance entre les compartiments humain, animal et environnemental.